科瑪嘉O157顯色培養基

改良科瑪嘉O157顯色培養(yang) 基使用說明書(shu)

組分

科瑪嘉O157顯色培養(yang) 基一瓶，添加劑A和B各一支。

瓊脂 15.0 g/L   蛋白腖和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1、取瓶內(nei) 幹粉29.2g溶於(yu) 1000mL去離子水的潔淨三角瓶中，充分攪拌混勻。也可根據需要按照29.2 g/L的比例擴大或縮小製備培養(yang) 基的量。

2、加熱至100℃，不停攪拌，使其*溶解。切勿加熱超過100℃，切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱，應將培養(yang) 基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變為(wei) 大氣泡，直至*溶解即可。切勿使培養(yang) 基溢出。
3、加熱後的培養(yang) 基冷卻至45℃~50℃，輕輕地搖動均勻，傾(qing) 注平皿，使其凝固，晾幹備用。

對於(yu) 汙染較為(wei) 嚴(yan) 重的樣品，使用添加劑可增強CHROMagar O157顯色培養(yang) 基的選擇性：

       在添加劑A中加入1ml無菌水，在添加劑B中加入1ml 95%乙醇，輕輕搖動或放置於(yu) 37℃水浴中，待內(nei) 容物全部溶解方可使用。然後以無菌操作分別加入到冷卻至45℃~50℃的培養(yang) 基中，輕輕混勻。（添加劑A、B各1ml，用於(yu) 1000ml培養(yang) 基，可按比例放大或縮小，剩餘(yu) 的添加劑可以保存在-20℃冰箱中，有效期為(wei) 半年）。

保存  該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nei) 貯存2周（2℃~8℃，避光）。

接種

劃線或塗布接種（冰箱內(nei) 保存的平板使用前應恢複至室溫），在36

±1℃恒溫條件下有氧培養(yang) 18-24h。

結果

性能及局限

   大腸杆菌O157靈敏度為(wei) 98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺乏亞(ya) 碲酸鉀時，各種非大腸杆菌O157菌株可以出現相同顏色的菌落（如沙門氏菌）。建議通過乳膠試驗驗證可疑菌落。大腸杆菌O157的鑒定需要做血清學實驗。

貯存條件

幹粉需保存於(yu) 15℃~30℃幹燥環境中，在有效期前使用。

汙染處理

使用過的培養(yang) 基需要在121℃滅菌至少20分鍾才可以按照有關(guan) 規定丟(diu) 棄。

附：供體(ti) 外診斷使用，產(chan) 品須專(zhuan) 業(ye) 人員操作。