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ECC顯色培養(yang) 基使用說明書(shu)
組 分
瓊脂:15.0 g/L 蛋白腖和酵母粉:8.0 g/L 氯化鈉:5.0 g/L
色素:4.8 g/L
pH值 7.2
操作
1、取瓶內(nei) 幹粉32.8g溶於(yu) 1000mL去離子水的潔淨三角瓶中,充分攪拌混勻。也可根據需要按照32.8 g/L的比例擴大或縮小製備培養(yang) 基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應將培養(yang) 基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變為(wei) 大氣泡,直至*溶解即可。切勿使培養(yang) 基溢出。
3、加熱後的培養(yang) 基冷卻至48℃,輕輕地搖動均勻,傾(qing) 注平皿,使其凝固,晾幹備用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nei) 貯存2周(2℃8℃,避光)。
接種
傾(qing) 注培養(yang) 法接種:接種1mL樣品於(yu) 直徑為(wei) 90mm的培養(yang) 皿中,然後傾(qing) 注10mL上述冷卻至48℃的培養(yang) 基,混勻使其凝固,36±1℃倒置培養(yang) 24小時。
表麵接種法:劃線或塗布接種(冰箱內(nei) 保存的平板使用前應恢複至室溫),在36
如果接種樣品為(wei) 糞大腸菌群,培養(yang) 溫度應設置為(wei) 44℃。如果采用MPN法總檢測大腸菌群,培養(yang) 溫度應設置為(wei) 30℃。
結果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
大腸杆菌(E.coli) | 藍色 |
其他大腸杆菌(含糞大腸菌群)(Other coliform bacteria) | 紅色(淡紫色,紫紅色) |
其他革蘭(lan) 氏陰性菌 | 無色 |
性能及局限
對大腸杆菌靈敏度為(wei) 97%(Ogden et al. 1991)。葡萄糖醛酸酶陰性大腸杆菌(如:大腸杆菌O157)可能出現假陰性結果,如果主要研究病原菌如大腸杆菌O157,可選用科瑪嘉大腸杆菌O157顯色培養(yang) 基。若主要研究總大腸菌群,哈夫尼菌屬出現假陰性結果,為(wei) 無色菌落。
貯存條件
幹粉需保存於(yu) 15℃30℃幹燥環境中,在有效期前使用。
汙染處理
使用過的培養(yang) 基需要在121℃滅菌至少20分鍾才可以按照有關(guan) 規定丟(diu) 棄。
附:供體(ti) 外診斷使用,產(chan) 品須專(zhuan) 業(ye) 人員操作。
法國科瑪嘉ECC顯色培養(yang) 基
法國科瑪嘉ECC顯色培養(yang) 基