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產(chan) 品用途
用於(yu) 大腸杆菌O157的分離和鑒定
組分
瓊脂 15.0 g/L 蛋白腖和酵母粉 13.0 g/L 色素1.2 g/L
pH值 6.9± 0.2
操作
1、取瓶內(nei) 幹粉29.2g溶於(yu) 1000mL去離子水的潔淨三角瓶中,充分攪拌混勻。也可根據需要按照29.2 g/L的比例擴大或縮小製備培養(yang) 基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應將培養(yang) 基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變為(wei) 大氣泡,直至*溶解即可。切勿使培養(yang) 基溢出。
3、加熱後的培養(yang) 基冷卻至45℃~50℃,輕輕地搖動均勻,傾(qing) 注平皿,使其凝固,晾幹備用。
保存
該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nei) 貯存2周(2℃~8℃,避光)。
質量控製
1、外觀
此幹粉培養(yang) 基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。製備好的培養(yang) 基平板為(wei) 淡黃色透明固體(ti) 。
2、微生物實驗
接種以下菌株於(yu) 該培養(yang) 基平板上,在36±1℃恒溫條件下有氧培養(yang) 18~24h。
質控菌株 | 菌落顏色 |
大腸杆菌O157:H7 ATCC 35150 | 淡紫色 |
大腸杆菌ATCC25922 | 深藍色 |
克雷伯氏菌ATCC13883 | 深藍色 |
糞腸球菌ATCC29212 | 抑製 |
性能及局限
大腸杆菌O157靈敏度為(wei) 98%(Bettelheim et al. 1998)。但缺乏亞(ya) 碲酸鉀時,各種非大腸杆菌O157菌株可以出現相同顏色的菌落(如沙門氏菌)。建議通過乳膠試驗驗證可疑菌落。大腸杆菌O157的鑒定需要做血清學實驗。對於(yu) 來源於(yu) 食品原料、生肉生食蔬菜、環境汙水等的樣品,可選用科瑪嘉改良O157顯色培養(yang) 基。
貯存條件
幹粉需保存於(yu) 15℃~30℃幹燥環境中,在有效期前使用。
汙染處理
使用過的培養(yang) 基需要在121℃滅菌至少20分鍾才可以按照有關(guan) 規定丟(diu) 棄。
附:供體(ti) 外診斷使用,產(chan) 品須專(zhuan) 業(ye) 人員操作。